Свойства ADBAC (АДБАХ) и DDAC

rx online

MIC свойства ADBAC (АДБАХ) и DDAC.Метод разведения агара (MIC) показал, что ADBAC и DDAC, по-видимому, ингибируют рост бактерий в течение 48 ч, когда им бросают вызов с плотностью S. aureus в диапазоне от 1 × 105 КОЕ/мл до 1 × 109 КОЕ/мл, с микрофлорой от 0,4 до 1,8 мкг/мл. Эти значения находились в пределах диапазона MIC, указанного для коммерческих Qac, от 0,5 до 5,0 мкг / мл (35). Acheampong (1) ранее исследовал действие чистых гомологов ADBAC с длинами углеродных цепей C9 и C14 против Escherichia coli. Acheampong (1) предположил, что когда клетки поглощают только небольшое количество биоцидного агента, увеличение концентрации клеток мало влияет на ингибирование, поскольку в исходной дозе вызова присутствует достаточное количество свободного биоцида. Это наблюдение было очевидно для ADBAC и DDAC в диапазоне концентраций от 1 × 105 КОЕ/мл до 1 × 107 КОЕ / мл, где Мик были согласованы для каждого агента. Увеличение Мик при концентрации клеток >1 × 108 КОЕ / мл может быть связано с увеличением резервуара клеточных отрицательно заряженных тейхоевых кислот, которые могут взаимодействовать с катионными молекулами биоцида, уменьшая доступную дозу в растворе.

Убить профили для ADBAC и DDAC.Профили зависимости kill от времени при концентрациях 35, 45 и 55 мкг / мл для ADBAC и DDAC при 25°C предполагали начальное быстрое взаимодействие биоцида с клетками, приводящее к снижению 2 — до 3-log10 в течение 3 мин. Такое быстрое снижение количества клеток уже ранее сообщалось в среде (30, 31). Другие авторы (8, 53) прокомментировали форму кривых убийства, называя их сигмоидальными, заканчивающимися в точке, где нет дальнейшего убийства. Эта тенденция, как правило, была более очевидной при 25°C, чем при 35°C в этом исследовании.

В данном исследовании, относительно ADBAC, увеличение температуры от 25°C до 35°C производится быстрее убивать и искоренять начальную задержку в убийстве наблюдается при температуре 25°С. Аналогичная тенденция наблюдалась и в предыдущем исследовании на среде с Гелинас и соавт. (16), где активность между 4°C и 50°C увеличивается с повышением температуры и увеличением времени контакта. Альстрем и др. (3) ранее наблюдалось, что амфифильные эфиры бетаина (QACs) при 0°C были менее активны, чем при 30°C, хотя сродство к связыванию оставалось неизменным. Считалось, что снижение убиения связано со снижением текучести наружной мембраны Salmonella enterica serovar Typhimurium. Снижение температуры и РН привело к образованию более плотно упакованного липополисахарида, что привело к снижению активности. Гилберт и др. (18) Ранее сообщалось, что по мере прохождения мембран через переход от высоких температур к низким они становятся более кристаллическими. В этом исследовании DDAC проявлял наибольшую биоцидную активность и, по-видимому, не влиял на температуру (47). Температурные тренды могут быть описаны значениями Q10, приблизительно от 1 до 2 для DDAC. Для ADBAC значения Q10 свидетельствуют о том, что примерно в три-четыре раза активность происходила при 35°C по сравнению с активностью при 25°C. Gélinas et al. (16) ранее сообщалось о двукратном увеличении активности ADBAC против S. aureus между 20°C и 37°C. Sundheim et al. (45) ранее сообщалось, что повышенная активность наблюдалась при повышении температуры дезинфицирующего средства QAC, используемого в пищевой промышленности, до 30-40°C.

Во время процедуры дезинфекции, показатель концентрации может подвергаться незначительным колебаниям. Хьюго и денье (23) представили значения η для фенола, которые показали, что η уменьшается с более высокими конечными значениями.

При повышении температуры с 25°C до 35°C значения η для DDAC уменьшились (1,6 и 1,8 для ADBAC и 1,6 и 1,2 для DDAC при 25 и 35°C соответственно [значения r2 0,05]). Тилли (49) ранее определил значения η для некоторых биоцидов и сообщил, что при повышении температуры в диапазоне от 10°C до 40°C значения η уменьшаются. По мере повышения температуры время уничтожения для достижения определенных конечных точек уменьшалось. Это, возможно, предполагает, что при повышении температуры происходит различие во взаимодействии клетки/биоцида, которое способствует убийству, что приводит к снижению показателей концентрации. Значения показателя концентрации для ADBAC незначительно увеличиваются с температурой.

Час поглощение и повреждение мембраны.Исследования изотермы поглощения для ADBAC и DDAC подчинялись паттернам L4 и H3/4 соответственно. DDAC обладал очень сильным связывающим сродством к клеткам S. aureus, и были зарегистрированы низкие остаточные уровни в жидкости супернатанта (равновесная концентрация). Это могло бы объяснить более высокие уровни убийства, испытанные с использованием агента DDAC, и это, возможно, также может быть ответственно за значительное замедление убийства через 5 минут. Изотермы поглощения и концентрации, используемые в этом исследовании, также были сообщены ранее Takasaki et al. (47, 48), которые сообщили, что DDAC быстро поглощается независимо от температуры обработки и что цитоплазматическая мембрана является первым местом поглощения, поскольку большая часть агента распределяется в мембранной и цитоплазматической фракциях. Тот факт, что температура не влияет на поглощение, может быть выведен из кривых «убить-пережить» при 25°C и 35°C, полученных в этом исследовании.

АДБАК при низких концентрациях проявлял умеренное связывание с инокулятом вызова, но при высоких концентрациях большие уровни биоцида оставались несвязанными. Из профиля изотермы поглощения ADBAC, по-видимому, существует ограничение на количество ADBAC, которое может быть адсорбировано клетками, возможно, из-за исчерпания сайтов связывания. Это наблюдение может быть связано с кривыми уничтожения ADBAC, где наблюдался эффект плато, предполагающий отсутствие дальнейшего уничтожения клеток. Несвязанные уровни ADBAC в надосадочной жидкости, возможно, могут доминировать по одной длине цепи гомолога. Acheampong (1) ранее наблюдал, что для гомологов ADBAC C14 имел более высокое сродство, чем C9 против E. coli в идентичных условиях.

Точки перегиба, наблюдаемые в изотермах, не были отмечены, но могли бы показать уровень концентрации, при котором дополнительные целевые участки подвергаются воздействию и становятся доступными для ADBAC и DDAC из-за критического повреждения мембраны (11, 26). Дифазные изотермы с первичными и вторичными плато насыщения были классифицированы для S, L и H Изотерм (2, 41). Это было верно для ADBAC и DDAC, первичные поглощения плато которых (отмеченные A и B) были между 6 и 7 мкг/2 × 109 клеток и 9 и 14 мкг/2 × 109 клеток, соответственно, приближаясь к пороговым концентрациям, необходимым для бактерицидной активности, где утечка внутриклеточных материалов сверх контрольных уровней стала очевидной.

Утечка как для АДБАК, так и для ДДАК происходила в бактерицидных концентрациях (>9 мкг/мл), а не в концентрациях, которые, как представляется, подавляют рост бактерий (<4,5 мкг/мл). Более высокие уровни утечки при 9 мкг/мл были вызваны DDAC (0,0276 мм), чем ADBAC (0,0278 мм), и эта концентрация потенциально отмечала границу между клеткой, высвобождающей внутренний пул материала до завершения или сопротивляющейся биоцид-индуцированным изменениям мембраны. Калий быстро вытекал из клеток по сравнению с 260-Нм поглощающим материалом при любой заданной концентрации биоцида. В целом, DDAC вызывал более быструю утечку, и при низких концентрациях просачивалось большее количество материала, чем ADBAC. Это было очевидно, когда концентрации, которые, как считается, достигают проницаемости мембраны (ADBAC, >9 мкг/мл [>0,0278 мм]; DDAC, >4,5 мкг/мл [>0,0138 мм]) и катастрофического коллапса мембраны (ADBAC, 15 мкг/мл [0,0463 мм]; DDAC, 12 мкг/мл [0,0368 мм]) были достигнуты. Было также очевидно, что клетки, подвергшиеся воздействию бактерицидных концентраций ADBAC и DDAC, немедленно высвобождали маркеры утечки, хотя и в разных количествах; внутренний материал пула высвобождался до завершения в течение короткого времени экспозиции, проявляя действия, аналогичные действию хлоргексидина (24). Концентрации, которые индуцировали утечку калия только не были очевидны, даже в концентрациях, которые, как представляется, ингибируют рост бактерий для ADBAC и DDAC.

Доказательства аутолиза, сопутствующие факторы и вклад в летальность.Аутолиз был очевиден для клеток, подвергшихся воздействию биоцида, когда утечка 260-Нм поглощающего материала в экзогенную среду превысила метаболический пул. Считалось, что это происходит из-за распада материала РНК, включая рРНК, активированными Рназами. Измерения 260-Нм поглощающего материала, высвобожденного при 35°C, подтвердили, что как ADBAC, так и DDAC инициировали автолиз, причем уровень аутолитиков увеличивался с увеличением времени контакта (42)

Добавить комментарий

Закрыть меню
×

Корзина

Обратный звонок