Антисептические средства, такие как триклозан

rx online

Антисептические средства, такие как триклозан [5-хлор-2-(2,4-дихлорфенокси)-фенол], ПВП–йод [Поли(винилпирролидон)–йодный комплекс], октенидин дигидрохлорид (октенидин), полигексанид (полигексаметиленбигуанид) и Хлоргексидин диглюконат (хлоргексидин) широко применяются для профилактики и терапии бактериальных инфекций, особенно для антисептики слизистых оболочек и ран.1-10 были опубликованы многочисленные исследования, касающиеся антимикробных свойств этих агентов.11-24 однако, нет систематических исследований, сравнивающих эти антисептики друг с другом с использованием стандартизированных и согласованных процедур испытаний. Кроме того, многие из этих исследований проводились с использованием коммерческих продуктов, таких как дезинфицирующие средства и скрабы для рук, которые содержат активные ингредиенты в различных концентрациях, что затрудняет сравнение антисептических свойств самого активного вещества и принятие решения о выборе антисептика по конкретным показаниям.

Для получения достоверной и воспроизводимой информации о МИК/минимальной микробицидной концентрации (МБК) (тест микродилюции; DIN 58940), а также о микробицидной эффективности (количественные суспензионные тесты; EN 1040, EN 1275) триклозана, ПВП–йода, октенидина, полигексанида и хлоргексидина было проведено сравнительное исследование в стандартизированных условиях на основе стандартов DIN EN 25–28.

Материалы и методы
Подготовка к испытаниям и нейтрализация
Октенидин (Schülke & Mayr GmbH, Norderstedt, Германия), полигексанид (Fagron GmbH & Co. Кг, Гамбург, Германия), ПВП–йод и Хлоргексидин диглюконат (Sigma-Aldrich Biochemie GmbH, Гамбург, Германия) разбавляли в воде стандартизированной жесткости (WSH; согласно DIN EN 104025) до конечной испытательной концентрации. Триклозан (Fluka/Sigma-Aldrich Biochemie GmbH, Buchs, Швейцария) был плохо растворим в воде, поэтому был приготовлен исходный раствор 50% триклозана в 80% диметилсульфоксиде (DMSO) и разбавлен в несколько этапов с получением конечной концентрации 1% триклозана в 40% DMSO/WSH. Все дальнейшие разведения готовили с 40% ДМСО/WSH. Пригодность в качестве растворителя 40% ДМСО / WSH в отношении неэффективности была продемонстрирована с использованием количественного суспензионного теста, а также в тесте микродилюции. После времени контакта 24 ч не наблюдалось микробицидного или микробистатического эффекта в отношении золотистого стафилококка, синегнойной палочки или Candida albicans.

В качестве нейтрализующих агентов использовали следующие растворы в соответствии с DIN EN 1040 и 1275:25,26 3,0% полисорбат 80 + 3,0% сапонин + 0,1% L-гистидин + 0,1% цистеин для нейтрализации октенидина, хлоргексидина и полигексанида; 3,0% полисорбат 80 + 0,3% лецитин + 0,3% L-гистидин + 0,5% тиосульфат натрия для нейтрализации ПВП–йода; и 8,0% полисорбат 80 + 2,0% SDS + 0,8% лецитин + 1,0% тиосульфат натрия + 6,0% сапонин (двухконцентрированный) для нейтрализации триклозана.

Для определения Мик и МБК в качестве первого этапа исследования все вещества были приготовлены в концентрациях в диапазоне 1024-0, 00390625 мг / л. диапазоны концентраций, используемые в количественных суспензионных испытаниях, сведены в таблицу 1.

Таблица 1
Диапазоны концентраций тест-препаратов, используемых в количественных суспензионных испытаниях согласно DIN EN 1040 и 127525,26

Антисептическое средство ПВП-йод Хлоргексидин октенидин Полигексанид триклозан
Диапазон концентраций (мг/л) 500-31. 25 4000-5 250-1 5000-1 50 000-10
Открыть в новой вкладке
Тест-организмы и питательные растворы
В методе микродилюции тест-организмы S. aureus (ATCC 6538), P. aeruginosa (ATCC 15442), C. albicans (ATCC 10231), Enterococcus faecalis (ATCC 29212), Streptococcus pneumoniae (ATCC 49619), Escherichia coli (ATCC 35218), Clostridium perfringens (ATCC 13124), Haemophilus influenzae (ATCC 49247), a метициллинрезистентный S. aureus (MRSA; Северогерманский эпидемический штамм, клинический изолят, Институт гигиены и экологической медицины, университет Грайфсвальда) и ванкомицинрезистентный энтерококк (VRE; использовались клинический изолят, Институт гигиены и экологической медицины, университет Грайфсвальда). За исключением H. influenzae и C. perfringens, бактерии культивировали на кровяном агаре и бульоне Мюллера-Хинтона (MHB). H. influenzae выращивали в MHB, дополненном 2% лизированной лошадиной кровью, 5 мг/л NAD и 5 мг/мл дрожжевого экстракта. C. perfringens культивировали в бульоне сердце–мозг–глюкоза или соответствующей твердой среде. C. albicans культивировали на агаре Sabouraud и в среде’ high-resolution ‘ (HR).

В количественных суспензионных тестах использовали тест-организмы S. aureus (ATCC 6538), P. aeruginosa (ATCC 15442) и C. albicans (ATCC 10231). Бактерии выращивались на казеин пептон соевый агар (КСА). С. albicans выращивали на солодовый экстракт агар (Меа).

Тест микродилюции
Чтобы определить, микрофоны и многобайтовые кодировки, Дин 58940-727 и 58940-828 и соответствующие дополнительные листы были строго соблюдены. Вкратце, тест-организмы культивировали на агаре при 36°С в течение 18 ч; после этого одну колонию переносили в 1 мл бульона Мюллера–Хинтона и разбавляли до 105 КОЕ/мл. Испытания проводились с использованием 96-луночных пластин микротитра. Каждую лунку заполняли 100 мкл определенного разведения антисептика и 100 мкл суспензии тест-организма.

Через 24 ч мутность оценивали как показатель роста бактерий. Для определения МБК образцы в диапазоне вокруг порога мутности через 24 ч переносили на кровяной агар, как описано в стандарте 28, и оценивали на рост через 24 ч.

Количественное испытание суспензии
Бактерицидную и фунгицидную эффективность определяли без органической нагрузки, строго следуя DIN EN 104025 и DIN EN 1275.26 кратко, 1 мл суспензии исследуемого организма и 1 мл WSH смешивали и инкубировали в течение 2 мин. Затем добавляли 8 мл соответствующего испытуемого вещества. Полученные растворы инкубировали в течение 1, 5, 10, 60, 360 или 1440 мин. По окончании времени контакта 1 мл исследуемого раствора переносили в 8 мл соответствующего нейтрализующего раствора и 1 мл WSH и нейтрализовали в течение 5 мин. После этого 1 мл нейтрализованного испытательного раствора распределяли на две питательные агаровые пластины. После инкубации в течение 24 ч (бактерии) или 48 ч (дрожжи) подсчитывали колонии и подсчитывали количество извлекаемых колоний (Na) в исследуемом растворе. Коэффициент восстановления (RF) определяли как разность между логарифмическим числом ячеек в исследуемом растворе в начале времени контакта (N0) и логарифмическим числом Na.

В дополнение к DIN EN, контроль воды с использованием 8 мл WSH вместо тест-препарата был выполнен одновременно в первом тестовом прогоне, чтобы исключить любые бактерицидные эффекты WSH. В контроле воды существенной разницы по сравнению со значениями N0 не наблюдалось.

Результаты
Микрофоны и МБК
Максимальное значение антисептического агента описывает концентрацию, необходимую для ингибирования или уничтожения индивидуально наиболее устойчивого тест-организма. Для хлоргексидина, октенидина и полигексанида были определены сопоставимые концентрации 16-32 мг/л для MIC48 и MBC24. Уровень MIC24 хлоргексидина (32 мг/л) был на том же уровне, в то время как содержание октенидина (8 мг/л) и полигексанида (4 мг / л) было ниже. Для триклозана максимальные значения варьировали от 256 до 512 мг/л с отчетливым разрывом эффективности против P. aeruginosa, в то время как максимальные значения PVP-йода составляли 1024 мг/л с разрывом эффективности против S. pneumoniae

Добавить комментарий